EZ Trans細(xi)胞轉(zhuan)染試劑與EZ 慢病毒系列/原代細胞轉染試劑

轉(zhuan)染(ran)試劑產品(pin)描(miao)述

EZ Trans細(xi)胞轉(zhuan)(zhuan)染試劑作為(wei)新(xin)一代的轉(zhuan)(zhuan)染試劑，其轉(zhuan)(zhuan)染原理是帶正電的陽離子聚合(he)物與(yu)核酸中帶負(fu)電(dian)(dian)的磷酸基團形成(cheng)帶正電(dian)(dian)的復(fu)合物(wu)后與細胞(bao)表面帶負(fu)電(dian)(dian)的蛋白多糖(tang)相(xiang)互作用，并通過(guo)胞(bao)吞作用進入細胞(bao)。

本產品經過李記生物的優(you)化(hua)處理，具有轉染效率高，細胞毒(du)性(xing)(xing)低，操作簡單(dan)，重復性(xing)(xing)好，適(shi)用范圍廣等特點。

以下(xia)為高效轉染試劑說明書，其他產品詳(xiang)情請(qing)問銷售人員。

細胞(bao)轉(zhuan)染試劑與慢病毒訂購(gou)信息

轉染試劑運輸(shu)與保存

藍冰運輸。4℃保存，有效期12個月。【注】：不可冷凍！

高效轉染試劑使用方法(fa)（以 24 孔板為例，其他培養皿中(zhong)轉染請參考(kao)表(biao)1）

1. 接種細胞

對(dui)于貼壁細(xi)胞，轉(zhuan)染前18-24 h進行鋪(pu)板（不含抗生(sheng)素(su)），使其在轉(zhuan)染時的密(mi)度大約在80%左右。對于(yu)懸浮細胞，轉染(ran)當(dang)天(tian)，配(pei)制EZ Trans-DNA復(fu)合物之前進行鋪板，每(mei)500 µL生長(chang)培養基中加入4~8×10⁵cells。  

【注(zhu)】：培養液中的(de)血清不(bu)影(ying)響轉染(ran)效率(lv)。轉染(ran)試劑使用量受細胞類型及其他實驗條(tiao)件影(ying)響，建(jian)議初次使用時設置梯(ti)度進行優(you)化(hua)最佳使用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合(he)物

（1）對于每孔細(xi)胞，將(jiang)1 μg質粒DNA稀釋到40 μL無血清的高(gao)糖DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基(ji)），混(hun)勻。

（2）對(dui)于每孔(kong)細胞(bao)，將3 μL EZ Trans轉染試劑(ji)稀(xi)釋(shi)到(dao)40 μL無血清的高糖DMEM培(pei)養基（或(huo)者OPTI-MEM Ⅰ 培(pei)養基），輕(qing)輕(qing)混勻。

【注】：無血(xue)清(qing)的高糖(tang)DMEM培養基是稀釋(shi)液(ye)，不(bu)能使(shi)用含血清的培養基進行DNA和(he)EZ Trans轉(zhuan)染(ran)試劑(ji)的稀釋(shi)。因為(wei)EZ Trans-DNA轉(zhuan)染復合物的形成過程不能含(han)有血(xue)清。

（3）將(jiang)稀釋好的EZ Trans轉(zhuan)染試劑全(quan)部加(jia)入到已稀(xi)釋(shi)好的質(zhi)粒(li)DNA中，輕輕混勻(yun)。

【注】：此混(hun)合的順序不能反向進行。

（4）室溫放置(zhi)10-15 min，以形(xing)成EZ Trans-DNA復合物(wu)。

3. 轉(zhuan)染(ran)細胞

（1）將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuan)染復合物均勻(yun)滴入(ru)到含細胞(bao)的培養(yang)皿中。輕(qing)(qing)(qing)輕(qing)(qing)(qing)晃動培養(yang)皿或輕(qing)(qing)(qing)微振蕩，讓EZ Trans-DNA復合物分散均勻(yun)。

（2）在(zai)37℃，5% CO₂培(pei)養箱培(pei)養6-18 h，去除含EZ Trans-DNA復合(he)物的(de)培養(yang)液，更換新的(de)培養(yang)液，繼續培養(yang)至對(dui)轉(zhuan)入基(ji)因表達(da)分析(xi)。

【注】：篩選穩定轉染(ran)細胞株，轉染(ran)細胞24 h后，將細(xi)胞傳代至新鮮的生長培(pei)養基(ji)中（將細(xi)胞稀(xi)釋(shi)10倍(bei)以上），在37℃，5% CO2培養箱中孵育(yu)24 h，加入篩選(xuan)培養基(ji)。在有轉染抗性(xing)基(ji)因(yin)相匹配的(de)藥(yao)物篩選(xuan)條件下(xia)，約 1～2周(zhou)可篩選(xuan)到耐藥(yao)性(xing)克隆，在這期間需經常更換含篩選(xuan)藥(yao)物的(de)生長培養基(ji)。

注意事項(xiang)

1. 本產品僅限(xian)于科學(xue)實驗研究使(shi)用(yong)，不得用(yong)于臨床診斷、治療等領域。

公(gong)司簡介(jie)

　　上海李記生物科技有限(xian)公司是一(yi)(yi)家(jia)集研發、生產(chan)、銷售為一(yi)(yi)體的(de)高科技生物技術企業，產(chan)品(pin)涵蓋(gai)細胞生物學(xue)、分子(zi)生物學(xue)、動物學(xue)等，我們的(de)產(chan)品(pin)都(dou)基于設(she)計，在保(bao)證品(pin)質的(de)前提下，具(ju)有易用、經濟、高效的(de)特點(dian)。
　　我(wo)(wo)們立(li)志做百年企業，我(wo)(wo)們愿與您一同成長(chang)，很多我(wo)(wo)們的(de)產品創意來自于像您一樣的(de)客戶老師，我(wo)(wo)們提供的(de)不僅是產品，還有一個創新平臺，我(wo)(wo)們期(qi)待您的(de)參與，攜(xie)手發(fa)展，共(gong)創輝煌。實現中國夢，是全民(min)族的(de)事，生命(ming)科學(xue)領(ling)域中的(de)你我(wo)(wo)同樣肩負使命(ming)，讓我(wo)(wo)們用(yong)不同的(de)方式貢(gong)獻自己的(de)力量！

　　李記優勢產品：蛋白(bai)Marker、EZ Trans細胞(bao)轉染液、CCK-8細胞活性增殖檢(jian)測(ce)試劑、支(zhi)原(yuan)體快速檢(jian)測(ce)試劑盒、核酸(suan)染料（GelRed）、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒(he)、熒光染料(liao)（Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5）、胎牛血清、細胞凋亡檢測試劑盒、原代細胞轉染試劑等。

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