Alexa Fluor 405 標記鬼筆環肽（藍色）

產(chan)品描(miao)述
　　鬼筆環肽是從一種菌類Amanita Dhalloides所提取出來(lai)的(de)(de)環(huan)肽。它與F-actin競爭(zheng)性的(de)(de)結合。熒光標(biao)(biao)記的(de)(de)鬼筆環(huan)肽在(zai)納(na)克(ke)水平(ping)就(jiu)可與F-actin選擇性的(de)(de)結合并且易溶于水，為檢(jian)測組(zu)織切片，培養細胞和(he)無細胞體系中(zhong)的(de)(de)actin的(de)(de)定(ding)位(wei)和(he)定(ding)量提供(gong)了非常方(fang)便的(de)(de)標(biao)(biao)記方(fang)法。

　　本(ben)產品與Sigma P5282等(deng)產品相比(bi)更具優(you)勢、替代性，詳情見下文(wen)或(huo)咨(zi)詢銷售人員。
　　本產品為Alexa Fluor 405 標記鬼筆環肽（藍色），可發出高(gao)亮度、穩定的藍色熒光，染色反應(ying)特異性(xing)強(qiang)，對比(bi)性(xing)高(gao)，適合用作F-actin的定性(xing)和(he)定量(liang)檢測(ce)。與Actin抗體比(bi)較，Alexa Fluor405鬼筆環肽(tai)具有如(ru)下優點：(1)與actin亞單(dan)位一(yi)比(bi)一(yi)結合，并且(qie)不與G-actin結合，具有比(bi)Actin抗體更好的(de)染色效果。(2)且(qie)本(ben)品的結合沒有物種差異性，適(shi)用性廣泛。(3)鬼筆環肽標記(ji)的非特異性信號可忽略，因(yin)而圖像的反差較好(hao)。(4)染(ran)色(se)與用于細胞分析的(de)其(qi)他熒光染(ran)色(se)*兼容，包括熒光蛋(dan)白(bai)、Qdot® 納米(mi)晶體(ti)和(he)其(qi)他Alexa Fluor偶聯物（包含Alexa Fluor偶聯二抗)。(5)經本品結合后的F-actin仍能維(wei)持actin自身具有的許多(duo)生物(wu)學特性。
技術資料
1. Ex(nm)：400
2. Em(nm)：421
3. 分(fen)子量：約1400
4. 溶(rong)劑：DMSO
5. 結構式：

訂購信息

保(bao)存方法
　　冰袋運輸，收到貨后(hou)可(ke)按需分裝，并(bing)于-20℃避(bi)光干燥保存，避(bi)免反(fan)復凍融(rong)。1年有效(xiao)。
使(shi)用(yong)方法
1.  準(zhun)備1× Alexa Fluor405標記鬼筆環肽工作液
吸(xi)取1 μL 1000×Alexa Fluor405標記鬼筆(bi)環肽存(cun)儲液(ye)到1 mL含(han)有1%BSA的(de)PBS緩(huan)沖液中即可得(de)到1×工作液。
【注】：不同的細胞染(ran)色后情況不同，相應Alexa Fluor405鬼筆環肽使(shi)用(yong)量也(ye)需(xu)根(gen)據不(bu)同情況而(er)定。
2.  細胞(bao)染(ran)色步(bu)驟
（1）細胞(bao)培養過夜或(huo)更(geng)長(chang)，使其密度達(da)到50~60%匯合度。
（2）吸掉培養液，37℃預熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。
（3）使用(yong)含有3~4%甲醛的PBS溶液(ye)進行(xing)細胞(bao)固定(ding)，室(shi)溫固定(ding)10-30min。
【注(zhu)】：避免(mian)固定劑中(zhong)含有(you)甲(jia)醇成分，因為甲(jia)醇在固定過(guo)程中(zhong)可能(neng)破壞肌動蛋白。
（4）室溫(wen)條(tiao)件下，用PBS清(qing)洗固定好的細胞(bao)2~3次(ci)，每次(ci)10 min。
（5）（可(ke)選）：室(shi)溫條件(jian)下，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透(tou)化處理3~5 min，從而增加其通(tong)透性。
【注】：鬼筆(bi)環肽的分(fen)子量(liang)小，很容易(yi)通過細(xi)胞，一般情(qing)況下不需對細(xi)胞進行(xing)冷丙tong和(he)TRITON X-100處理。
（6）室溫條件下(xia)，用(yong)PBS清(qing)洗細胞2~3次(ci)，每次(ci)10 min。
（7）每孔加入 Alexa Fluor405標記鬼筆環肽工作液(ye)100 μL/孔（96孔板），室溫避光染(ran)色20~90 min，夏(xia)季時間相對短些。
（8）用PBS清洗細胞3次，每次5 min，去除掉多余的(de)Alexa Fluor405標記鬼筆環(huan)肽。
（9）（可(ke)選）：加(jia)入足量的即用型DAPI溶(rong)液對細胞(bao)核進行復染，如：100 μL/孔（96孔板），室(shi)溫3~5 min。用(yong)PBS清(qing)洗細胞(bao)2次，每次5 min。
（10）于熒光顯微鏡或(huo)者共(gong)聚焦顯微鏡下(xia)進行熒光觀(guan)察，選擇Alexa Fluor405激發/發射濾片（Ex/Em=400/421 nm）和/或DAPI激發/發射濾片（Ex/Em=364/454 nm）。