Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽（綠色）

產品(pin)描述
　　鬼筆(bi)環肽是(shi)從(cong)一種菌類Amanita Dhalloides所(suo)提(ti)取出來的(de)環肽。它與F-actin競(jing)爭(zheng)性的(de)結合。熒(ying)光標記的(de)鬼筆(bi)環肽在納克水(shui)平(ping)就可(ke)與F-actin選擇(ze)性的(de)結合并且易溶于水(shui)，為檢測組織切片，培養細胞和無細胞體系中的(de)actin的(de)定(ding)位(wei)和定(ding)量(liang)提(ti)供了非常方(fang)便的(de)標記方(fang)法。
　　本品為Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽（綠色），可發出高亮度、穩定(ding)的(de)綠色(se)熒(ying)光，染色(se)反應(ying)特異(yi)性強，對比(bi)性高，適合用作F-actin的(de)定(ding)性和定(ding)量(liang)檢測。與Actin抗(kang)體比(bi)較，Alexa Fluor 488鬼筆環肽(tai)具有如下優點：(1)與(yu)actin亞單位(wei)一比一結合(he)，并且不與(yu)G-actin結合(he)，具有比Actin抗(kang)體更好的染色效果。(2)且(qie)本品的結合沒有物種差(cha)異(yi)性，適(shi)用性廣泛(fan)。(3)鬼筆環肽標記的(de)非(fei)特(te)異性信號(hao)可忽略，因(yin)而圖像的(de)反(fan)差較好(hao)。(4)染色(se)與用于細胞分(fen)析的其他(ta)熒光(guang)染色(se)*兼容，包括(kuo)熒光(guang)蛋(dan)白、Qdot® 納米晶(jing)體和其他(ta)Alexa Fluor偶(ou)聯(lian)物（包含Alexa Fluor偶(ou)聯(lian)二抗(kang))。(5)經本品結合(he)后的(de)(de)F-actin仍能(neng)維持actin自身具有(you)的(de)(de)許(xu)多生物(wu)學特性。
技術資料
1. Ex(nm)：493
2. Em(nm)：517
3. 分(fen)子量：1900
4. 溶劑：DMSO
5. 結構式：

訂購(gou)信(xin)息

保存(cun)方(fang)法
　　冰袋運輸(shu)，收到(dao)貨后可按(an)需分裝(zhuang)，并于-20℃避(bi)光干燥保(bao)存，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融。1年(nian)有效。
使(shi)用(yong)方法
1. 準(zhun)備(bei)1× Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽工作液(ye)
吸(xi)取1 μL 1000×Alexa Fluor 488標記鬼(gui)筆環肽存儲液到(dao)1 mL 含有1%BSA的PBS緩沖液(ye)中即可得到1×工作液(ye)。
【注】：不同的細胞(bao)染色(se)后情(qing)況不同，相應Alexa Fluor488鬼筆環肽(tai)使用量(liang)也需根(gen)據不同情況而定。
2. 細胞染色(se)步驟(zou)
（1）細胞培養過夜或(huo)更長，使其密度達(da)到(dao)50~60%匯合度。
（2）吸掉培養液，37℃預(yu)熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。
（3）使用含(han)有(you)3-4%甲(jia)醛的(de)PBS溶液進行細胞固(gu)定，室(shi)溫固(gu)定10~30 min。
【注】：避免固定(ding)劑中含有甲醇成分，因為(wei)甲醇在固定(ding)過程中可能破壞肌動蛋白。
（4）室溫條(tiao)件下，用(yong)PBS清洗固定好的細胞2~3次，每(mei)次10 min。
（5）（可選）：室溫條件(jian)下(xia)，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透(tou)化處理3~5 min，從而(er)增加其通透性。
【注】：鬼筆(bi)環肽的分子量小，很容易通過細(xi)胞，一般情況下不(bu)需對細(xi)胞進(jin)行冷丙tong和TRITON X-100處理。
（6）室溫條件(jian)下(xia)，用PBS清洗細胞2~3次，每次10 min。
（7）每孔(kong)加入 Alexa Fluor 488標記(ji)鬼筆環肽工作(zuo)液100 μL /孔(kong)（96孔(kong)板），室(shi)溫避(bi)光染色20~90 min，夏季時間相對短些。
（8）用PBS清洗細(xi)胞3次，每(mei)次5 min，去除掉多余(yu)的Alexa Fluor 488標記(ji)鬼筆環(huan)肽(tai)。
（9）（可選）：加(jia)入足量的即用型DAPI溶液對細胞核(he)進(jin)行復染，如：100 μL /孔（96孔板），室溫3~5 min。用PBS清洗細胞2次，每次5 min。
（10）于熒(ying)光(guang)顯微鏡或(huo)者(zhe)共聚焦顯微鏡下進行熒(ying)光(guang)觀察，選擇Alexa FluorTM 488激發(fa)/發(fa)射濾片（Ex/Em=493/517nm）和/或(huo)DAPI激發(fa)/發(fa)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。